熒光分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)與原理
熒光分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)與原理
熒光分光光度計(jì)是一種用于掃描液相熒光標(biāo)記物發(fā)出的熒光光譜的儀器。它可以提供激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等多項(xiàng)物理參數(shù),從各個(gè)角度反映分子的鍵合和結(jié)構(gòu)。通過(guò)測(cè)量這些參數(shù),不僅可以進(jìn)行一般的定量分析,還可以推斷分子在各種環(huán)境中的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)和功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長(zhǎng)掃描范圍一般為190~650nm,發(fā)射波長(zhǎng)掃描范圍為200~800nm。可用于凝膠條等液體和固體樣品的光譜掃描。
基本結(jié)構(gòu)和原理
高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光通過(guò)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)射熒光。熒光經(jīng)過(guò)過(guò)濾和反射后,由光電倍增管接受,然后以圖形或數(shù)字的形式顯示出來(lái)。
基本結(jié)構(gòu)及原理,光源與探測(cè)器成直角排列。
1、光源:
高壓汞蒸氣燈或氙弧燈,后者能發(fā)出高強(qiáng)度的連續(xù)光譜,在300nm~400nm范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等,故較常用。
2、激發(fā)單色儀:
放置在光源和樣品室之間的激發(fā)單色器或*單色器用于濾除特定的激發(fā)光譜。
3、發(fā)射單色器:
發(fā)射單色儀或第二單色儀置于樣品室和檢測(cè)器之間,單色儀常采用光柵。過(guò)濾掉特定的發(fā)射光譜。
4、探測(cè)器:
通常,光電管或光電倍增管用作檢測(cè)器。光信號(hào)可以被放大并轉(zhuǎn)換成電信號(hào)。
5. 樣品室:
由石英池(用于液體樣品)或固體樣品架(用于粉末或薄片樣品)組成。測(cè)量液體時(shí),光源與檢測(cè)器成直角布置;測(cè)量固體時(shí),光源與檢測(cè)器呈銳角排列。